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影響毛細(xì)管電泳儀峰面積重現(xiàn)性的因素及解決辦法

更新時(shí)間:2021-03-03      點(diǎn)擊次數(shù):1707
    毛細(xì)管電泳儀分析對進(jìn)樣技術(shù)要求很高,進(jìn)樣操作事項(xiàng)如下:
  1.進(jìn)樣區(qū)帶越小越好:無論采用何種進(jìn)樣方式,毛細(xì)管插入樣品溶液的深度一般要少于毛細(xì)管總長度的1%~2%,以盡量減少樣品溶液經(jīng)毛細(xì)吸附進(jìn)入毛細(xì)管而影響進(jìn)樣量的性。樣品管中溶液少為5μL,進(jìn)樣體積為1~50nL。
  2.進(jìn)樣時(shí)間以短為宜:通常進(jìn)樣時(shí)間為0.5~1s,此時(shí)毛細(xì)管粘附的樣品量相對于吸入的體積可忽略不計(jì)。雖然毛細(xì)管電泳的進(jìn)樣時(shí)間可至±0.1s,但由于毛細(xì)管插入樣品管時(shí)不可避免地會粘附一些溶液,進(jìn)樣時(shí)間過短會影響分析的重復(fù)性。
  3.樣品預(yù)濃縮:受毛細(xì)管內(nèi)總體積的制約,對于濃度很稀的樣品,毛細(xì)管電泳不能象HPLC那樣可加大進(jìn)樣量來提高檢測靈敏度,但可采取一些措施來改善。
  毛細(xì)管電泳儀峰面積重現(xiàn)性的因素及解決辦法:
  1.溫度變化。
  原因與結(jié)果:改變粘度和進(jìn)樣量。
  解決辦法:毛細(xì)管恒溫。
  2.樣品蒸發(fā)。
  原因與結(jié)果:增加樣品濃度。
  解決辦法:加蓋和冷卻自動進(jìn)樣器。
  3.樣品過載。
  原因與結(jié)果:額外進(jìn)樣。
  解決辦法:使用進(jìn)樣端平滑的毛細(xì)管。
  4.毛細(xì)管插入樣品引起零進(jìn)樣。
  原因與結(jié)果:額外進(jìn)樣。
  解決辦法:不能消除,但能量化。
  5.毛細(xì)管電泳儀分壁吸附樣品。
  原因與結(jié)果:峰形畸變無樣品流出。
  解決辦法:改變緩沖液pH值,增加濃度,使用添加劑。
  6.信噪比低。
  原因與結(jié)果:積分誤差。
  解決辦法:優(yōu)化積分參數(shù),增加樣品濃度,用峰高測定。
  7.電動進(jìn)樣。
  原因與結(jié)果:樣品基質(zhì)不同。
  解決辦法:采用壓力進(jìn)樣。

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